亚洲精品SUV精品一区二区-成人免费在线电影-日韩码一码二码三码区别69-日韩不卡在线观看视频不卡-最近2019中文字幕视频免费看-国产免费观看高清电视剧在线看-特写BBWWBBWWBBWW-麻豆传煤网站入口免费进入官方

新聞中心

News Center

當(dāng)前位置:首頁(yè)新聞中心從外周血淋巴細(xì)胞(PBls)中分離RNA

從外周血淋巴細(xì)胞(PBls)中分離RNA

更新時(shí)間:2013-03-09點(diǎn)擊次數(shù):1347

[方法]
1.收集新鮮人血液并立即用Ficoll分離白細(xì)胞。
2.用冰冷PBS洗滌外周血淋巴細(xì)胞3次。
3.在50ml塑料離心管中收集外周血淋巴細(xì)胞,并加入7ml裂解緩沖液(可溶解達(dá)到5×108個(gè)外周血淋巴細(xì)胞),然后劇烈渦旋振蕩以溶解細(xì)胞。
4.加入7體積(49m1)4m01/L氯化鋰,4℃孵育15~20小時(shí)(過夜)。
5.將懸液轉(zhuǎn)移到30mlCorex管內(nèi),在吊桶式轉(zhuǎn)頭內(nèi)4℃離心2小時(shí),6500r/min。
6.棄去上清,并用Kimwipe擦拭試管口。用3mol/L氯化鋰(大約15ml)重懸,收集沉淀.將沉淀重懸液離心,6500r/min 1小時(shí)。
7.棄去上清,用2m1RNA溶解液溶解沉淀。在-20℃下,*冷凍懸液。
8.復(fù)溶懸液,每10分鐘渦旋20秒,共45分鐘。
9.用等體積酚抽提1次,并用等體積氯仿抽提1次。
10.加入1/10體積的3mol/L乙酸鈉,pH 4.8和2體積一20℃乙醇。*混合溶液,并在-20℃下孵育過夜。
11.在吊桶式轉(zhuǎn)頭內(nèi)離心RNA,12000r/min 30分鐘。用0.2m1DEPC處理水重懸沉淀。將溶解的DNA轉(zhuǎn)移至1.5m1微量離心管內(nèi),并加入1/10體積3mol/L乙酸鈉,pH 4.8和2體積一20℃乙醇,重新沉淀。并以乙醇沉淀物形式保存RNA,直至準(zhǔn)備使用時(shí)。

www.chinafangding.com

日日噜噜大屁股熟妇| 91欧洲操逼视频| 成人啪啪AV| 麻豆视传媒官方网站入口在线| 免费看污又色又爽又黄的小说男男 | 五月丁香手机在线| 五月久久婷婷丁香| 日本色频| 日韩按摩二区| 五月丁香中文字幕| 99热无码首页| 台湾佬电影网| 色婷婷五月综合欧美图片| 最近更新2019中文字幕国语| 九九这里有精品| 色婷婷成人做爰A片免费看网站 | 婷婷九月激情| 99小视频网站| 天天操天天插| 精品一卡2卡3卡四卡在线| 美足下的激 18p| 人人干97| 色五月综合| 成人做爰A片免费看视频| 成人无码精品1区2区3区免费看| 日韩蜜乳视频| 五月天操逼激情| 狠狠99| 熟女激情网| 国产成人99久久亚洲综合精品|